Question

【題目】【生物一選修3:現代生物科技專題】某質粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質粒獲得轉基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。

（1）抗鹽某因是否在煙草細胞中穩定遺傳的關鍵是________________。

（2）在構建重組質粒時，應選用__________和__________兩種酶對目的基因和質粒進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

（3）將目的基因導入植物細胞采用最多的方法是農桿菌轉化法。含有目的基因的農桿菌可根據標記基因進行篩選。若農桿菌在含有氨芐青霉素和四環素的培養基上都可以生長繁殖，農桿菌中是否己含有目的基因？

__________(是/否)。為什么？_________________________________________________。

（4）愈傷組織經__________形成完整植株，這一過程需要再轉接到___________培養基上進行培養，該過程的實質是__________________。

Answer 1

【答案】 抗鹽基因（目的基因）是否插入到煙草的染色體DNA上 HindⅢ SalⅠ 否 含有目的基因的質粒抗四環素的基因被破壞 再分化 分化 基因的選擇性表達

【解析】試題分析：本題結合轉基因抗鹽煙草的培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養等知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，能根據圖中限制酶的位置及題干要求選擇正確的限制酶；掌握目的基因檢測和鑒定的方法等。

（1）抗鹽某因是否在煙草細胞中穩定遺傳的關鍵是抗鹽基因（目的基因）是否插入到煙草的染色體DNA上。

（2）只有SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA與質粒，形成相同的黏性末端，容易發生自身連接和反向接入；HindⅢ會破壞目的基因；則在構建重組質粒時，應選用SalⅠ、HindⅢ兩種酶對質粒和含抗鹽基因的DNA進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

（3）選用SalI、HindIII兩種酶對質粒進行切割時，形成的重組質粒中含抗氨芐青霉基因而抗四環素基因被破壞，故農桿菌中沒有含有目的基因，為篩選出導入了重組質粒的農桿菌，應在培養基中加入氨芐青霉素。

（4）愈傷組織經再分化，形成完整植株，這一過程需要再轉接到分化培養基上進行培養，細胞分化的實質是選擇性表達。