Question

【題目】下圖四種質粒含有E1和E2兩種限制酶的識別位點，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環素的抗性基因。

（1）基因工程中使用的限制酶，其特點是_________。

（2）將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質粒X-1混合連接，連接后獲得的質粒類型有 。（多選）

①X-1 ②X-2 ③X-3 ④X-4

（3）若將上圖所示X—1、X—2、X—3、X—4四種質粒導入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環素的兩種培養基上。在這兩種培養基上均不能生長的大腸桿菌細胞類型有 。

（4）如果X-1用E1酶切，產生850對堿基和3550對堿基兩種片段：那么質粒X-2（Tcr基因的長度為1200對堿基）用E2酶切后的片段長度為 對堿基。

Answer 1

【答案】（1）特異性地識別和切割DNA

（2）①②③

（3）無質粒細胞和含X-3的細胞

（4）4750

【解析】

試題分析：（1）基因工程中使用的限制酶，其特點是特異性地識別和切割DNA。

（2）用限制酶E1切開質粒X-1后，質粒X-1暴露出兩個粘性末端，APr被切下．兩端用E1切開的Tcr基因含有與上述切割后的質粒X-1，Apr含有相同的粘性末端，混合后可形成X-1、X-2和X-3。

（3）含質粒X-1的細胞可在含青霉素培養基上生長，含質粒X-2的細胞可在含四環素培養基上生長；含質粒X-3的細胞不含抗性基因，不能在兩種培養基上生長；不含有質粒的細胞也不能在兩種培養基上生長。

（4）X-2的長度為1200+3550=4750，用E2酶切后質粒由環狀變為鏈狀。