Question

【題目】前列腺癌是發生在前列腺上皮的惡性腫瘤，可分為雄性激素依賴性和雄性激素非依賴性兩種類型。請回答下列問題。

（1）研究發現，前列腺癌發生的根本原因是外界致癌因子引起了__________，可能還與飲食習慣等因素有關。

（2）為了探究奧曲肽對兩種前列腺癌的治療效果，研究者對體外培養的人前列腺癌DU145和LNCaP細胞采用不同劑量奧曲肽（0、0.1、1、10、100和1000nmol/L）處理，分別于24h、48h、72h測定并計算細胞增殖抑制率，結果如下圖所示。

注：DU154是雄性激素非依賴性前列腺癌細胞；LNCaPj 雄性激素依賴性前列腺癌細胞。

①在培養過程中，動物細胞具有__________生長的特點，當培養的細胞增殖到一定程度時，會出現__________現象，因此要對其進行傳代培養，通常需要用__________酶處理，使細胞分散開以備新的細胞懸液。

②由上圖結果可知，奧曲肽對于__________性前列腺癌的治療效果可能更好。

（3）為進一步探明奧曲肽的作用機制，研究人員在相同條件下，用1000nmol/L的該多肽處理DU145細胞，分別于24h、48h、72h提取各組細胞總RNA，再以mRNA為模板__________出cDNA，然后用PCR技術擴增相應片段，并對擴增結果進行凝膠電泳來測定細胞中VEGF和Caspase-3的轉錄水平，結果如下圖所示。

注：VEGF是促進血管生成的基因，可刺激腫瘤細胞的生成和增殖：Caspase-3是細胞凋亡過程中最主要的蛋白酶基因

β-actin是檢測基因表達水平常用的參照基因，表達量不受細胞形態變化或生活條件的影響，轉錄水平相對穩定，在實驗中可作為校準和消除由于檢測方法等無關變量對實驗結果的影響。β-actin的表達產物最可能是____________________（填字母）。

A．血紅蛋白 B．細胞骨架蛋白 C．胰島素

由實驗結果可知，奧曲肽抑制了DU145細胞中__________基因的轉錄水平。據此研究人員推測，奧曲肽治療前列腺癌的機制可能是__________（2分）。

Answer 1

【答案】 基因突變（原癌基因和抑癌基因發生突變） 貼壁 接觸抑制 胰蛋白 雄性激素非依賴 逆轉錄 B VEGF 通過抑制VEGF基因的表達，減少腫瘤細胞增殖和腫瘤血管的生成，從而抑制腫瘤生長：促進Caspase-3基因的表達，加速腫瘤凋亡

【解析】試題分析：奧曲肽（1000nmol/L，處理24h）對于雄性激素非依賴性前列腺癌細胞DU145抑制率較高，故奧曲肽對于雄性激素非依賴的治療效果更好。奧曲肽處理DU145細胞時間越長VEGF基因的表達量越少，Caspase-3基因的表達越高，由實驗結果可知，奧曲肽抑制了DU145細胞中VEGF基因的表達，促進Caspase-3基因的表達：。

（1）癌癥發生的原因是致癌因子引起了基因突變（原癌和抑癌基因發生突變），可能與飲食習慣等因素有關。
（2）①動物在培養過程中，細胞具有貼壁生長的特點，癌細胞失去接觸抑制，因此傳代培養時，通常用胰蛋白酶處理，使細胞分散。

在培養過程中，動物細胞具有貼壁生長的特點，當培養的細胞增殖到一定程度時，會出現接觸抑制現象，因此傳代培養時，通常用胰蛋白酶處理，使細胞分散。
②由圖1結果可知，奧曲肽（1000nmol/L，處理24h）對于雄性激素非依賴性前列腺癌細胞DU145抑制率較高，故奧曲肽對于雄性激素非依賴的治療效果更好。
（3）為進一步探明奧曲肽的作用機制，研究人員在相同條件下，用1000nmol/L的該多肽處理DU145細胞，分別于24h、48h、72h提取各組細胞總RNA，再以mRNA為模板逆轉錄出cDNA，然后用PCR技術擴增相應片段，p-actin基因檢測基因表達水平常用的參照基因，表達量不受細胞形態變化或生活條件的影響，轉錄水平相對穩定，在實驗中可作為校準和消除由于檢測方法等無關變量對實驗結果的影響。而A血紅蛋白基因和C胰島素基因并非在所有細胞中都有表達，表達量受細胞形態變化（細胞分化）的影響，轉錄水平不穩定，故p-actin的表達產物最可能是B細胞骨架蛋白（該基因在所有細胞中都表達）。
由圖2可知：奧曲肽處理DU145細胞時間越長VEGF基因的表達量越少，Caspase-3基因的表達月高，由實驗結果可知，奧曲肽抑制了DU145細胞中VEGF基因的表達，減少腫瘤細胞增殖和腫瘤血管的生成，從而抑制腫瘤生長，促進Caspase-3基因的表達，加速腫瘤凋亡。