Question

【題目】福建山區(qū)發(fā)現(xiàn)一種珍稀植物水晶蘭，全草含藥用價值很高的水晶蘭甙。某科研所將水晶蘭甙基因?qū)�入玉米中制備出能合成水晶蘭甙的玉米愈傷組織細胞，流程圖如下。回答下列問題：

（1）HindⅢ和BamHⅠ等限制酶主要是從 ______中分離純化得到的，都作用于DNA特定部位的_________鍵。使用HindⅢ和BamHⅠ兩種酶切割Ti質(zhì)粒可防止切開的質(zhì)粒重新連接起來，原因是_________。圖中②過程需要加入_________酶。

（2）基因工程使用的運載體除質(zhì)粒外，還常用_________等。若需要大量合成目的基因，可采用PCR技術進行擴增，其條件除需模板、原料外，還需__________________等。

（3）圖中生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因玉米的核心步聚是_________________（填標號）。將目的基因?qū)�入玉米細胞的方法�?/span>_________，這種方法的優(yōu)點是能使目的基因隨著Ti質(zhì)粒的_________插入到植物細胞的_________上，使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。

（4）④過程是__________________，過程⑤中可以用__________________技術進行檢測篩選。

Answer 1

【答案】 原核生物（或微生物） 磷酸二酯 兩種限制酶切割后產(chǎn)生不同的黏性末端 DNA連接 動植物病毒、λ噬菌體衍生物 熱穩(wěn)定DNA聚合酶、引物 ② 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 T-DNA 染色體DNA 脫分化 抗原-抗體雜交

【解析】試題分析：分析題圖，圖示是將水晶蘭甙基因?qū)�入玉米中制備出能合成水晶蘭甙的玉米愈傷組織細胞，其中①表示獲取目的基因的過程，②表示基因表達載體的構建過程，③表示將目的基因?qū)�入受體細胞甲的過程，④表示脫分化過程，⑤表示檢測玉米愈傷組織細胞是否合成水晶蘭甙，常用抗原-抗體雜交技術。

（1）HindⅢ和BamHⅠ都為限制酶，一般取自于原核生物，是基因工程的剪刀，能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；兩種限制酶切割后產(chǎn)生不同的黏性末端，所以可以防止切開的質(zhì)粒重新連接起來；②表示基因表達載體的構建過程，需要用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接起來。

（2）基因工程常用的運載體有質(zhì)粒、動植物病毒、λ噬菌體衍生物等。PCR技術擴增目的基因需要的條件有模板、原料、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶等。

（3）轉(zhuǎn)基因技術的核心步驟是②構建基因表達載體；圖示將目的基因?qū)�入玉米細胞（植物細胞）的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上，使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。

（4）圖中④是脫分化過程；⑤檢測目的基因是否翻譯形成蛋白質(zhì)可用抗原-抗體雜交法。