Question

【題目】(12分)柑橘是重要的經濟作物，經深加工可生產果汁、酒精、含胡蘿卜素的食品添加劑。請回答下列相關問題：

(1) 在生產酒精的過程中，發酵溫度控制在 ℃。發酵過程中定期打開排氣裝置，目的是 。

(2) 可用 的方法提取柑橘中的胡蘿卜素，將提取的胡蘿卜素粗品通過 法進行簽定。

(3) 柑橘加工產生大量皮渣，嚴重污染環境。研究發現，皮渣能被枯草桿菌分解，但發酵過程中產生的有機酸，導致pH下降，影響其分解效果。通過輻射處理枯草桿菌，篩選獲得耐酸菌株 A、B。

①篩選菌株時，枯草桿菌生長繁殖所需要的主要營養物質有碳源、氮源、 四類，該培養基中果膠為唯一碳源，只有能將果膠分解成 的微生物才能生長。

②純化菌株時，使用的涂布工具是 。取某一稀釋液涂布了三個平板，其中一個平板無菌落，另外兩個有菌落。造成無菌落的操作失誤最可能是 。

③用分離得到的果膠酶進行了相關實驗，結果如圖。

請據圖分析：處理柑橘皮渣時，選用菌株 ，理由是 。

Answer 1

【答案】(12分，除標注外，每空1分）

(1) 18-25 放出（細胞呼吸產生的/發酵產生的）CO2

(2) 萃取 紙層析

(3) ①水和無機鹽 半乳糖醛酸

②涂布器 涂布器沒有冷卻(2分）

③A 在酸性條件下，果膠酶長時間保持較高活性(2分）

【解析】（1）酒精發酵的溫度應控制在18-25℃，發酵過程中定期打開排氣裝置是為了放出細胞呼吸產生的二氧化碳，防止出現發酵液沖出發酵罐。

（2）提取胡蘿卜常用萃取法，提取的胡蘿卜素用紙層析法進行鑒定，此時要用到標準的胡蘿卜素樣品。

（3）①培養基上至少應含有碳源、氮源、水和無機鹽四種物質。果膠分解后是半乳糖苷酸的微生物才能在以果膠為唯一碳源的培養基上生長。

②純化菌種有稀釋涂布平板法和平板劃線法，前者用的是涂布器，后者用的是接種環，故是涂布器。涂布前要對涂布器進行灼燒滅菌，但在涂布時應將其冷卻，如果沒有冷卻會導致殺死菌種，沒有菌落的出現，所以很可能是涂布器沒有冷卻。

③綜合分析應選用菌株A，因為從圖分析可知在酸性條件下，果膠酶長時間保持較高活性。

提取 方法	水蒸氣蒸餾法	壓榨法	萃取法
實驗 原理	利用水蒸氣將揮發性較強的植物芳香油攜帶出來	通過機械加壓，壓榨出果皮中的芳香油	使芳香油溶解在有機溶劑中，蒸發溶劑獲得芳香油
方法 步驟	①水蒸氣蒸餾 ②分離油層 ③除水過濾	①石灰水浸泡、漂洗 ②壓榨、過濾、靜置 ③再次過濾	①粉碎、干燥 ②萃取、過濾 ③濃縮
適用 范圍	適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發性強的芳香油	適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取	適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細小，能充分浸泡在有機溶劑中
優點	簡單易行，便于分離	生產成本低，易保持原料原有的結構和功能	出油率高，易分離
局限 性	水中蒸餾會導致原料焦糊和有效成分水解等問題	分離較為困難，出油率相對較低	使用的有機溶劑處理不當會影響芳香油的質量