Question

【題目】肥胖已經(jīng)嚴(yán)重危害人類健康。3T3-L1前脂肪細(xì)胞是小鼠胚胎來源、具有纖維母細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞株，在胰島素（INS)、地塞米松（DEX)和3-異丁基-1-甲基-黃嗓呤（IBMX)的共同刺激下，具有100%分化成成熟脂肪細(xì)胞的能力，是目前國(guó)際上體外研究肥胖及脂代謝常用的細(xì)胞模型。為研究發(fā)酵大麥提取物對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響，科研人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。將一定數(shù)目的植物乳桿菌接種到經(jīng)過處理的粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發(fā)酵大麥提取物（LFBE)。除不接種植物乳桿菌外，其余操作方法相同，制備未發(fā)酵大麥提取物（RBE)。實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果如下。（表格中+表示加入了該物質(zhì)，-表示未加入）

組別 處理方法	模型組	空白組	對(duì)照組（提取物濃度ug/mL）			實(shí)驗(yàn)組（提取物濃度ug/mL）
			100	200	400	100	200	400
3T3-L1前脂肪細(xì)胞+培養(yǎng)液	+	+	+	+	+	+	+	+
1 ；	+	-	-	-	-	-	-	-
2 ；	-	-	+	+	+	-	-	-
3 ；	-	-	-	-	-	+	+	+

（1）表格處理方法1、2、3的變量分別是__________、__________、_________。

（2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：經(jīng)RBE處理3TL3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化后，與模型組相比，中低濃度的RBE均未顯著減少細(xì)胞分化率，400ug/mLRBE處理組細(xì)胞分化率為模型組的90%。與模型組細(xì)胞相比，經(jīng)LFBE處理3TL3-L1前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化后，低、中和高三個(gè)濃度的LFBE均能顯著減少細(xì)胞分化率。與RBE相比，LFBE明顯抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化且隨濃度增加，抑制能力加強(qiáng)，其中400ug/mLLFBE組細(xì)胞分化率只占模型組的40%，僅比空白組多14%。請(qǐng)用柱狀圖表示出所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

______

（3）要觀察3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化成成熟脂肪細(xì)胞的程度，可用_________染色，典型的成熟脂肪細(xì)胞的形態(tài)表現(xiàn)為細(xì)胞進(jìn)一步增大，呈圓形，胞內(nèi)布滿__________色脂滴，密集于核周，形成“指環(huán)樣”結(jié)構(gòu)。

（4）多種激素和生長(zhǎng)因子在脂肪細(xì)胞分化過程中發(fā)揮著重要的作用。近些年的研究顯示，這些激素或生長(zhǎng)因子在作用于脂肪細(xì)胞膜表面的________后，經(jīng)不同信號(hào)通路的信號(hào)傳遞，通過直接或間接的修飾調(diào)控脂肪細(xì)胞分化的轉(zhuǎn)錄因子活性，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)脂肪細(xì)胞分化的調(diào)控。

Answer 1

【答案】 INS、DEX、IBMX RBE LFBE 蘇丹Ⅲ 橙黃色 特異性受體

【解析】本題考查實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、脂肪的鑒定，激素作用特點(diǎn)相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解、作圖和應(yīng)用能力。

（1）實(shí)驗(yàn)中要遵循單一變量的原則，由題意可知3T3-L1前脂肪細(xì)胞在胰島素（INS)、地塞米松（DEX)和3-異丁基-1-甲基-黃嗓呤（IBMX)的共同刺激下，具有100%分化成成熟脂肪細(xì)胞的能力。而該實(shí)驗(yàn)研究的是發(fā)酵大麥提取物對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響所以實(shí)驗(yàn)表格中處理方法1應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)模型應(yīng)是INS、DEX、IBMX三者都有，2組應(yīng)是對(duì)照組即未發(fā)酵大麥提取物RBE，3應(yīng)是實(shí)驗(yàn)組RBE。

（2）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果作圖即可，以細(xì)胞分化率為縱坐標(biāo)，以不同濃度的RBEH和LFBE為橫坐標(biāo)，1組作為標(biāo)準(zhǔn)模型即分化率為100%為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，因?yàn)?00ug/mLLFBE組細(xì)胞分化率只占模型組的40%，通過計(jì)算空白對(duì)照組應(yīng)占40%-14%=26%；圖中要表示出400ug/mLLFBE組細(xì)胞分化率只占模型組的40%，因?yàn)殡S著LFBE濃度增加，抑制能力加強(qiáng)，所以低濃度的LFBE細(xì)胞分裂率比該濃度的要高即可。

（3）脂肪可以用蘇丹Ⅲ進(jìn)行染色，會(huì)出現(xiàn)橙黃色的現(xiàn)象。

（4）激素和生長(zhǎng)因子需要與特異性受體結(jié)合后才能發(fā)揮作用，所以只有作用于脂肪細(xì)胞膜表面的特異性受體后才能發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。