Question

【題目】下圖是利用基因工程技術生產人胰島素的操作過程示意圖，請據圖完成下列問題。

（1）能否利用人的皮膚細胞來完成①過程？_____________，為什么？__________________。

（2）過程②必需的酶是____________酶，過程③必需的酶是____________酶。

（3）在利用A、B獲得C的過程中，必須用_________切割A和B，使它們產生__________，再加入____________，才可形成C。

（4）為使過程⑧更易進行，可用____________（藥劑）處理D。

Answer 1

【答案】（1）不能 皮膚細胞中的胰島素基因未表達（或未轉錄），不能形成胰島素mRNA

（2）逆轉錄 解旋 （3）同一種限制性內切酶 相同的黏性末端 DNA連接酶 （4）CaCl2

【解析】

分析題圖，圖中①表示從胰島B細胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉錄過程，A為胰島素基因；③④⑤表示表示目的基因的擴增過程；⑥表示用限制酶切割運載體形成黏性末端的過程，B為質粒；⑦表示基因表達載體的構建過程，C為重組質粒；⑧表示將目的基因導入受體細胞的過程，D為含有重組質粒的大腸桿菌；⑨表示目的基因隨著受體細胞的增殖和擴增；⑩是從培養液中獲取胰島素的過程。

（1）細胞中的基因是選擇性表達的，人體的皮膚細胞中的胰島素基因未表達，不會產生胰島素mRNA，所以不能利用人的皮膚細胞來完成①過程。

（2）根據以上分析已知，過程②為逆轉錄過程，該過程需要逆轉錄酶的催化；過程③為DNA的解旋過程，需要解旋酶的催化。

（3）根據以上分析已知，圖中A為胰島素基因，B為質粒，C為重組質粒；必須用同一種限制酶切割胰島素基因（目的基因）和質粒，使得它們產生相同的黏性末端，再用DNA連接酶連接才可以形成重組質粒。

（4）過程⑧表示將目的基因導入大腸桿菌的過程中，可以用鈣離子處理大腸桿菌，使之成為感受態細胞，便于重組質粒的進入。