Question

【題目】圖甲、乙分別表示質(zhì)粒和外源DNA，其中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，下列敘述正確的是（　　）

A. 用質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒過(guò)程中，不能使用SmaI切割

B. 圖甲所示的質(zhì)粒分子在經(jīng)SmaI酶切割后含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

C. 為獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入DNA聚合酶

D. 用EcoRI、HindⅢ和BamHI中的任意一種酶切割質(zhì)粒和外源基因都可以

Answer 1

【答案】A

【解析】據(jù)圖分析，質(zhì)粒中，SmaI的切割位點(diǎn)位于標(biāo)記基因（抗生素抗性基因）上，在外源DNA分子中，SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，因此用質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，A正確；圖甲所示的質(zhì)粒分子只有一個(gè)SmaⅠ切割位點(diǎn)，所以在經(jīng)SmaⅠ酶切割后含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，B錯(cuò)誤；為獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶，C錯(cuò)誤；只使用EcoRⅠ，則質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用連接酶連接時(shí)，會(huì)產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切時(shí)，在目的基因上只有一個(gè)酶切位點(diǎn)，因此不能切割目的基因，D錯(cuò)誤。